顯微鏡觀察方式中的相差模式（也稱為相襯觀察或澤尼克相襯觀察）是一種在生物學(xué)研究中應(yīng)用廣泛的技術(shù)，主要用于觀察活細(xì)胞等無(wú)色透明樣品。以下是關(guān)于相差模式的詳細(xì)解釋：

1. 成像原理

• 相差模式利用光的干涉原理，將光程的相位差轉(zhuǎn)換為振幅（亮度）變化，從而提高了分界面的襯度，使無(wú)色透明的物質(zhì)也能成為清晰可見。

• 對(duì)于和周圍介質(zhì)折射率相差不大的透明狀物體，光線通過(guò)物體時(shí)波長(zhǎng)和振幅變化不顯著，難以分辨。但相差模式通過(guò)特定的光路設(shè)計(jì)和部件，使直射和衍射光之間產(chǎn)生相位差，進(jìn)而形成振幅變化，增強(qiáng)了圖像的對(duì)比度。

2. 關(guān)鍵部件

• 相差聚光鏡：在光源與聚光鏡之間加入相差環(huán)（環(huán)形光闌），使透過(guò)聚光鏡的光線形成環(huán)形光。相差環(huán)的環(huán)狀孔直徑和孔寬與物鏡內(nèi)的相位環(huán)板匹配，以確保形成的像落在物鏡后焦面與相位板上的共軛面重合。

• 相差物鏡：鏡片中含有氟化鎂等材料制作的相位板，是相差效果的核心。相位板根據(jù)相差物鏡的種類可分為正相差和負(fù)相差。

3. 應(yīng)用領(lǐng)域

• 細(xì)胞培養(yǎng)：在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，不允許對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行染色。為了對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)觀察，必須在專用的倒置顯微鏡中加相差裝置。

• 尿分析：用于辨認(rèn)新鮮尿中各種細(xì)胞和管型，特別是透明管型、白細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞以及紅細(xì)胞形態(tài)的分類等。

• 微生物學(xué)檢驗(yàn)：用于不染色或染不上色的細(xì)菌、螺旋體、真菌孢子等的快速辨認(rèn)，特別是對(duì)具有鞭毛、莢膜等特殊形態(tài)微生物的鑒別。

• 血液學(xué)檢驗(yàn)：用于血小板計(jì)數(shù)、血液中寄生蟲檢查和某些活細(xì)胞觀察等。

4. 總結(jié)

相差模式通過(guò)特定的光路設(shè)計(jì)和部件，將光程的相位差轉(zhuǎn)換為振幅變化，提高了圖像的對(duì)比度，使無(wú)色透明的物質(zhì)也能清晰可見。這種觀察方式在生物學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用，特別適用于活細(xì)胞等無(wú)色透明樣品的觀察。